维生素C制剂的鉴别、杂质检查、含量测定方法综述

维生素C制剂的鉴别、杂质检查、含量测定方法综述

摘要：维生素C即L-抗坏血酸是一种水溶性维生素，具有多种剂型。

ChP2010收载有维生素C原料及其片剂、泡腾片、颗粒剂、泡腾颗粒

剂、注射剂和复方制剂维生素C银翘片。维生素C银翘片系临床常

用于治疗流行性感冒引起的发热头痛、咳嗽、口干、咽喉肿痛等症状

的复方制剂，其组份为VitC、金银花、桔梗、连翘、对乙酞氨基酚、

芦根等成份，其中V itC易发生氧化导致含量显著降低。根据其结构

性质采用不同的方法对其进行鉴别、检查、含量测定。

关键词：维生素C制剂;鉴别;检查;含量测定

内容：

仪器及试剂

（1）仪器 紫外可见分光光度计；高效液相色谱仪；分析天平；薄层

板；滴定管等。

（2）试剂 硝酸银试液、二氯靛酚、碘滴定液、亚甲蓝乙醇溶液、淀

粉指示剂、草酸、醋酸、盐酸、硫酸等。

一 维生素C片

【鉴别】

1. 与硝酸银的反应：

方法：精密称取本品适量（约相当于维生素C 0.2g）,加水10ml溶

解。取该溶液5ml，加硝酸银试液0.5ml，即生成银的黑色沉淀。

2. 与2,6-二氯靛酚反应：

方法：取本品适量（约相当于维生素C 0.2g），加水10ml溶解。取该

1

溶液5ml，加2,6-二氯靛酚钠1～2滴，试液的颜色即消失。

3. 薄层色谱法：

方法：取本品细粉适量（ 约相当于维生素C l0mg），加水10 ml，振

摇使维生素C溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取维生素C 对

照品， 加水溶解并稀释制成l ml 中约含1mg的溶液，作为对照品溶

液。照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各2uL,分别点于同一硅胶GF

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薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5：4：1）为展开剂，展开，晾干，

立即置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品溶液所显主斑点的位置和

颜色应与对照品溶液的主斑点相同。

【检查】

1. 颜色检查：

取本品的细粉适量（约相当于维生素C 0.1g），加水20ml，振摇使

溶解，滤过，滤液照分光光度法在440nm处测定，吸光度不得超过

0.07。

2. 片重差异检查：

随机抽取药片20片，精密称定总重量，再分别称定各片的重量，

最后计算片重差异限度。根据药典规定0.3g以下片重差异限度为

-7.5%—7.5%，0.3g及以上者为-0.5%—0.5%，超出重量差异限度

的片剂不得多于2片，并不得有一片超过限度的1倍。

【含量测定】

1. 碘量法：

2

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素

C 0.2 g），置100ml量瓶中，加新沸过的冷水10ml与稀醋酸10 ml的混

合液适量，振摇使维生素C溶解并稀释至刻度，摇匀，迅速滤过，

精密量取续滤液50ml，加淀粉指示液lml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）

滴定，至溶液显蓝色并持续3 0秒钟不褪。每1ml碘滴定液（0.1 m o l

/L ）相当于8.806mg的C

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HO。

2. 紫外分光光度法：

取本品20片，精密称定，研细称取适量（约相当于维生素C 0.05g），

置100ml量瓶中，加0.005mol/L硫酸溶液至刻度，摇匀，滤过，

弃去初滤液，精密量取滤液2ml至100ml容量瓶中，用0.005mol/L

硫酸液稀释至刻度，摇匀，在245nm波长处测吸收度。

二 VC银翘片

【鉴别】

与2,6-二氯靛酚反应：

方法：取维生素C银翘片10片，除去糖衣，精密称定，研细，混匀，

充分研磨，精密称定适量(约相当于维生素C 0.2 g)，置100 ml量瓶

中，加新煮沸的冷开水10 ml、稀醋酸10 ml，振摇使充分溶解，用水

稀释至刻度，摇匀滤过，取续滤液适量，用氨试液调节pH至中性，

加入适量活性炭（每30mL续滤液中加0.5 g活性炭），加热至沸，滤

过。取二氯靛酚钠试液数滴置点滴板，滴加滤液数滴，试液的蓝色即

消退。

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【检查】

1.颜色检查：

取本品的细粉适量（约相当于维生素C 0.1g），加水20ml，振摇使

溶解，滤过，滤液照分光光度法在440nm处测定，吸光度不得超过

0.07。

2.片重差异检查：

随机抽取药片20片，精密称定总重量，再分别称定各片的重量，

最后计算片重差异限度。根据药典规定0.3g以下片重差异限度为

-7.5%—7.5%，0.3g及以上者为-0.5%—0.5%，超出重量差异限度

的片剂不得多于2片，并不得有一片超过限度的1倍。

【含量测定】

1、HPLC法：

试剂：醋酸铵、醋酸钠、醋酸、磷酸二氢钾，均为分析

纯;甲醇、乙腈，为色谱纯;蒸馏水，Vc对照品

方法：（1）

维生素C标准液的配制：精密称取维生素C对照品0. 0241 g,

置50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得对照品液.

（2）流动相的配制：精密称取1.5416 g 醋酸铵,加入1000 mL 蒸馏水

使其溶解,量取330 mL,加入670 mL 甲醇,10 mL 醋酸,混匀,用0.45

um 滤膜滤过,超声脱气10 min.

（3）色谱条件:色谱柱Krosmasil C18( 4. 6 mm×250 mm, 5 um);流动

相:甲醇-醋酸(0.02mol/ L)醋酸(体积比67:33:1);流速0.8 mL/ min;检

4

测波长: 249 nm; 柱温: 20℃;进样量:20 uL,灵敏度:1.0000 AUFS.

（4）试液的配制及测定:避光操作, 取样品10片,除去糖衣,精密称定,

研细,精密称取适量( 约相当于维生素C 0.2 g),置于100 mL的量瓶中,

加甲醇30 mL,超声振荡10 min,使充分溶解, 用新煮沸的冷蒸馏水稀

释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液5 mL,置50 mL 量瓶中,加蒸

馏水至刻度,摇匀,精密吸取上述溶液20 uL 注入液相色谱仪,测定.

2、紫外分光光度法

试剂：试剂1(5mg/ L Cu溶液) 称取醋酸酮(分析纯)lmg用去离子

2+

水溶解成含Culmg/ml溶液。在5ml该溶液中加入lmol/ L醋酸钠溶液

2+

(分析纯)200m1, lmol/ L醋酸溶液(分析纯)7m1和去离子水750m1，调

pH至6.0，再用去离子水定溶至1L

试剂2( 5×10mo1/ L EDTA溶液) 取0. O5mol/ L乙二胺四乙酸二钠

－4

溶液(分析纯)5.0ml用去离子水稀释至5OOmI。

VitC标准液(lmg/ ml) 取VitC精制品按《中国药典》方法，准确配制

lmg/ ml VitC标准液。

方法：取VitC银翘片3片研磨成粉末，定溶至100m1取该溶液25m1

用去离子水稀释1倍，再用清洁干燥滤纸过滤弃去初滤液，取续滤液

0.6m1加去离子水定溶至10.0ml制成待测样品溶液，按表1测定。

充分混匀后，用比色杯光径1 cm在260nm处用去离子水调零，读取

各管吸光度值A。计算VitC(ug/ml)= (Au- Ab) ×40/(As-Ab)

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三 维生素C注射液

【鉴别】

1.

取本品适量用水稀释制成l ml 中含维生素C l0 mg的溶液，取

4ml，加0.l mol/L的盐酸溶液4 mL，混匀，加0.05 %亚甲蓝乙醇溶

液4滴，置40℃水浴中加热，3分钟内溶液应由深蓝色变为浅蓝色

或完全褪色。

2.

取本品适量用水稀释制成l ml 中含维生素C l mg的溶液，作为

供试品溶液；另取维生素C对照品，加水稀释成1ml中约含1mg

的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶

液各2ul，分别点于同一硅胶薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5：

4：1）为展开剂，展开，晾干，立即置紫外光灯（254 nm）下检

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视。供试品溶液所显主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑

点相同。

【检查】

1. PH值：取本品测PH值，应为5.0-7.0。

2. 颜色：ChP2010采用紫外分光光度法，将样品配成含维生素C 50

mg/ml的溶液，在420 nm处测定其吸光度，标准规定吸光度应<0.06

3. 草酸：取本品，用水稀释制成每1ml中含维生素C 50 mg 的溶液，

精密量取5ml，加稀醋酸1ml与氯化钙试液 0.5ml，摇匀，放置1

小时，作为供试品溶液；精密称取草酸75 mg ，置500 ml量瓶中，

加水溶液并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml，加稀醋酸 1ml 与

氯化钙试液 0.5 ml，摇匀，放置 1小时 ，作为对照溶液。供试品

溶液产生的浑浊不得浓于对照溶液（0.3%）。

4. 其它：应符合注射剂项下有关的各项规定，如可见异物，热源，

无菌，装量，细菌内毒素检查等。

【含量测定】

精密量取本品适量（约相当于维生素C 0.2g），加水15ml、丙酮2ml，

摇匀，放置5ml，加稀醋酸4ml与淀粉指示液1ml，用碘滴定液

（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色并持续3 0秒钟不褪。每l ml定液

（0.05 m o l /L )相当于8.806mg的CHO。

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参考文献

[1] 孙春艳，定天明，陈宁林，胡敏，姜红.维生素c注射液质量评

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价及现行标准分析.中国现代应用药学2014,31(7):853-857.

[2]国家药典委员会.《中华人民共和国药典》（2010版第二部）.

北京:中国医药科技出版社,2010:901–905.

[3] 李春成,余丽丽,杨星昊,任勇. HPLC法测定Vc银翘片中Vc含量

的方法.科技通报,2004,20(4):349–354.

[4] 王少敏.紫外分光光度法测定维生素C片中维生素C含量.天津药

学.2007.19(15)：21-22.

[5] 徐岳鑫,董赛文,张雪峰.高效液相色谱法测定维C银翘片中维生

素C含量.中国药业.2008.17(10).

[6] 郭敏，李少伟.高效液相色谱法同时测定维C银翘片中维生素C

和扑热息痛的含量[J].国外分析仪器，2001(4): 50-52

[7] 中国卫生部编.中药成方制剂(第20册) [M].北京:人民卫生出版

社，1998.324

[8] 徐艺立,候玉松.紫外分光光度法测定维C银翘片中维生素C的含

量 [M].吉林市药品检验所:13-15.

[9] 王惠民,陈小红.高效液相法进行维C银翘片中维生素C的鉴别[B]

淮安药品检验所，江苏省淮安市223001. 1001-7585 ( 2008)03-

0356-02

[10] 赵敏,胡付华.高效液相色谱法测定维生素C注射剂的含量.中

国民族民间药:28-29.

[11] 李安荣,杨玲莉,夏代全.紫外分光光度法测定维生素C银翘片

中维生素C含量.中国药业.药品检测,2012.11(8):44-45.

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一些试剂的配制

1.硝酸银试液：可取用硝酸银滴定液0.1mol/L。（取硝酸银17.5g，

加水使溶解成1000ml即得。）

2.二氯靛酚钠试液：取2,6-二氯靛酚钠0.1g，加水溶解至100ml，

滤过即得。

3.淀粉指示剂：取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅匀后，缓缓倒入100ml

沸水中，边加边搅拌，继续煮沸2min，放冷，倾取上层清液即得。

本液应临用新配。

4.草酸溶液：取草酸6.3g，加水使溶解成100ml即得。

5.

碘滴定液：取碘13.0g，加碘化钾36g与水50ml溶解后，加盐

酸3d与水适量使成1000ml，摇匀，用垂熔玻璃滤器滤过。

NaOH溶液：取NaOH4.3g，加水使溶解成100ml即得。

5.稀盐酸（0.1mol/L）：取盐酸9ml，加水适量使成1000ml。

6.稀醋酸：取冰醋酸60ml，加水稀释至1000ml即得。

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