2024年3月19日发(作者：陆地巡洋舰多少钱一辆)
第
36
卷第
2
期
20
2
1
年
4
月
DOI
：
10.16535/.2020-316
大连海洋大学学报
JOURNAL
OF
DALIAN
OCEAN
UNIVERSITY
Vol.36
No.2
Apr
.202
1
文章编号
：
2095-1388
（
2021
）
02-0295-08
施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察
高丽楠?
,
胡红霞
2
2
”
,
王巍
,
董颖
,
吴立新
2
2
1
（
1.
大连海洋大学水产与生命学院
，
大连
116023
；
2.
北京市水产科学研究所渔业生物技术北京市重点实验室
，
北京
100068）
摘要
：
为深入了解鲟形目鱼类骨骼生长发育过程
，
探究现存唯一的软骨硬鳞鱼骨骼适应性进化
，
采用
软骨
-
硬骨双染色技术
，
对施氏鲟
Acipenser
schrenckii
Brandt
仔稚幼鱼的骨骼系统进行连续观察
，
总结出相
应骨骼的生长发育规律及骨化时间
。
结果表明：
施氏鲟初孵仔鱼观察不到明显的骨元件分化
；
仔鱼期的骨
骼元件主要集中在头部
，
然后逐渐长出脊索和各鳍
，
本阶段未观察到任何骨化骨骼
；
稚鱼期进入快速生长
阶段
，
10-15
日龄时脑颅
、
咽颅及附肢骨骼迅速发育
，
身体各部分骨骼基本形成
，
20
日龄时上颌骨
、
齿骨
及牙齿开始骨化
，
24
日龄时顶骨
、
后颞骨
、
下鳃盖骨
、
肩胛骨及背骨板外侧部分开始骨化
，
26
日龄时翼耳
骨
、
锁骨
、
匙骨开始骨化
，
28
日龄时颊骨、
额骨
、
胸鳍硬棘开始骨化
，
30
日龄时围框骨
、
侧骨板开始骨
化
，
背骨板基本完成骨化
；
进入幼鱼期
，
鱼体骨骼基础框架基本完成发育
，
吻部小骨片
、
腹骨板
，
以及腹
鳍
、
臀鳍
、
背鳍
、
胸鳍最外侧幅状鳍条均已发生骨化
。
研究表明
：
施氏鲟骨骼发育起始于孵化后
，
且在发
育过程中
，
与呼吸
（
颌弓
）
、
摄食
（
鳃弓
）
和游泳能力（
鳍
）
相关的骨骼优先发育
，骨骼骨化顺序与发育
顺序大概一致
，
20
日龄时首次观察到骨化的骨骼
，
但骨化主要集中在
24-30
日龄
；
施氏鲟骨骼骨化时间与
养殖环境
、
遗传等因素有关
，
本研究中还观测到不同批次施氏鲟骨骼骨化起始时间相差
10
do
关键词
：
施氏鲟
；
仔鱼
；
稚鱼
；
幼鱼
；
骨骼发育
；
骨化
中图分类号
：
S
965.
215
文献标志码
：
A
鲟鱼起源于泥盆纪
（
距今
4.
5-3.
5
亿年
）
，
是
发现对寻鱼骨骼骨化过程的研究
。
施氏鲟是中国现存寻寻鱼中最具有经济价值的优
质珍稀鱼类
，
其个体大
、
寿命长
、
生长速度快
，
是
最早的脊椎动物类群之一
，
也是软骨硬鳞亚纲
Chondrostei
中现仅存的唯一的目⑴
，
具有
“
活化
石
”
之称
，
在分类学上属于硬骨鱼总纲
Osterich-
thyes
辐鳍鱼纲
Actinopterygii
软骨硬鳞亚纲
Chon
?
中国最主要的寻寻鱼养殖种类
，
主要分布在黑龙江水
系
。
早在
1964
年就有学者对施氏寻寻
Acipenser
schrencki
Brandt
（
原文献中称北寻寻
）
［
II
］
的骨骼系统
drostei
鲟寻形目
Acipenserif
（
）
rmes
。
鲟鱼骨骼除头颅骨
外
，
绝大多数为软骨
，
是介于软骨鱼类与硬骨鱼类
进行了解剖研究
，
但在其发育过程中
，
骨骼骨化的
时间是未知的
。
本研究中
，
选取不同发育阶段施氏
鲟的仔稚幼鱼
，
采用阿尔新蓝
-
茜素红染色技术对
骨骼系统进行硬骨-软骨双染色
，
拍照
、
分析相应
骨骼的基本特征
，
并概述了骨骼骨化的时间
，
以期
之间的过渡类型
，
在鱼类进化史上具有重要地位
,
对研究脊椎动物的起源与进化具有重要的理论意
义
［I
］
,
而对仔稚幼鱼骨骼系统的研究将使鱼类系
统演化的讨论更加深入
,
且能探讨各类群间的系统
发育关系
［
2］
o
目前
，
国内有关鲟形目鱼类骨骼系
为进一步开展不同发育阶段寻鱼骨骼系统发育的研
究奠定基础
，
并为其环境适应及脊椎动物的起源与
统形态特征方面的研究报道较少
，
其中对白鲟
Pse-
phurus
gladius
骨骼系统
［
3-5
］
的研究最多且较为详
进化等相关研究提供基础资料
。
细
，
还有学者对短吻鲟
Acipenser
brevirostrum
Le-
sueur
［
6］
、
黄鲟寻
Acipenser
dabryanus［
1］
、
达氏鲤
Huso
dauricu
［8
］
、
中华寻寻
Acipenser
sinensis
Gray［
9
］
和西伯
1
材料与方法
1.1
材料
利亚寻
Acip
enser
.
gueldenstaedtii
［
I0
］
等其他种类的寻寻
形目鱼类骨骼系统形态特征进行了相关研究
，
但未
收稿日期
：
2020-11-30
基金项目
：
北京市现代农业产业技术体系专项
（
BAIC08-2020
）
试验用施氏鲟亲鱼来自北京市水产科学研究所
作者简介
：
高丽楠
（
1995
—
）
,
女
，
硕士研究生
：
*****************
通信作者
：
胡红霞
（
1972
—
）
,
女
，
研究员
o
：
huhongxiazh@
163.
com
296
大连海洋大学学报
第
36
卷
房山十渡鲟鱼繁育基地
。
1.
2
方法
1.2.1
施氏鲟仔稚幼鱼的培育
试验于
2020
年
6
鲟骨骼发育分期的基础上
，
分别在
12
个不同的时
间点随机采集样本
，
即孵化后
0
、
5
、
10
、
15
、
20
、
22
、
24
、
26
、
28
、
30
、
40
、
50
d，
每个时期采集的
样本不少于
5
个
，
避免采集外形畸形的样本
。
用过
月在北京市水产科学研究所房山十渡鲟鱼繁育基地
量的丁香酚麻醉后
，
采用电子天平称量体质量
，
用
游标卡尺测量全长
，
然后用体积分数为
10%
的福
尔马林溶液固定至少
24
h,
以确保充分固定
，
之后
进行
，
曾于
2019
年
6
月在此进行过预试验
。
对亲
鱼进行人工催产并通过人工授精获得受精卵
，
用滑
石粉脱黏后
，
转移到孵化器中孵化
。
初孵仔鱼在直
在室温下保存
，
用于骨骼染色
。
1.2.3
样本的骨骼染色
阿尔新蓝
-
茜素红
S
染
径
2
m
、
高
0.5
m
的圆形玻璃钢水槽中流水培育
,
每缸放养密度
8
000
尾鱼苗
，
水温
（
17.9±0.
5
）
C,
pH8.0~8.
2,
溶解氧量
4.5~5.8mg/L,
养殖用水
色法是一种比较成熟的方法
，
该方法可以对多种生
物样本进行软骨和硬骨染色
［
12-14
］
，
但是不同文献
由地下井水经曝气和充氧后使用。
鱼苗孵化后
7
d
中的方法步骤存在很大的差异
［
15-16
］
o
本研究中
,
在梁小毛
［
17
］
采用的阿尔新蓝
-
茜素红染色方法基础
上稍做改进
，
具体染色过程及方法如表
1
所示
。
1.2.4
骨骼染色样本的观察
染色的仔稚幼鱼样
开口摄食
，
用微颗粒饲料
（
山东圣索饲料科技有
限公司
）
投喂
，
间隔
3
h
投喂
1
次
，
每天投喂
8
次
，
初期投饵量为鱼体质量的
1.5%,
过量投喂
,
一周后根据鱼苗的生长情况
、
摄食情况及时调整投
饵量及更换不同粒径的饲料
。
投喂时水面静止
30
min
以上
，
让其充分摄食
，
并及时清理剩余饵料及
品放入加有甘油的培养皿中
，
用徕卡
（
Leica
）
M205FA
体视镜观察
，
用徕卡
LAS
V4.
8
拍照系统
进行图像采集
，
并用
Adobe
Photoshop
CS
软件
（
www.
photoshop,
com
）
进行处理
。
死去的鱼苗
，
保持水体清洁
。
1.2.2
样本的采集
在前期预实验初步判定施氏
表
1
阿尔新蓝
-
茜素红
S
染色法
Tab.
1
Alcian
blue
and
alizarin
red
S
staining
technique
染色步骤
staining
step
试验过程
experimental
process
将样本鱼麻醉
，
称量样本质量
，
测量体长和全长
，
稍大样本固定前需解剖去除内脏
，
注意不要采集外形
样本处理
ample
treatment
畸形的样品
用体积分数
10%
的福尔马林溶液浸泡鲟鱼样本
，
至少
24h
或更长时间
（
根据材料大小而定
）
，
浸泡完成
固定
fixation
后用蒸馏水冲洗样本至少
24
h,
或用自来水流水冲洗过夜
，
以彻底清除固定剂
。
再用梯度酒精溶液
（
30%
酒精
—50%
酒精
—
75%
酒精
—
95%
酒精
，
均为体积分数
）
浸泡脱水
，
每个体积分数的酒精浸泡时
间至少
0.
5
h
酶解
zymolysis
将样本浸泡在饱和硼砂钠的胰蛋白酶溶液中
，
置于保温箱内
，
温度设置为
34
C
左右
，
根据酶解程度调
整消化时间
，
直至稍见骨骼即可
，
每
20
min
检查一次酶解情况
。
其中
，
1.5g/L
的胰蛋白酶溶液配制
：
0.
15
g
胰蛋白酶和
100
mL
饱和硼砂钠溶液
软骨染色
cartilage
staining
用
0.2g/L
的阿利新蓝染色液浸泡鲟鱼样本
，
至少
24h,
期间可以更换染液
。
注意不要染色过度
，
否则
未被消化的肌肉会变蓝
。
其中
，
0.2g/L
阿利新蓝染色液配制
：
0.2g
阿利新蓝
8GN
、
700
mL
无水乙醇
和
300
mL
冰醋酸
用梯度酒精溶液
（
95%
酒精
—
75%
酒精
—
50%
酒精
—
30%
酒精
，
均为体积分数
）
浸泡水化
，
每个体积分
数的酒精浸泡时间至少
0.5h,
最后将样本转移到蒸馏水中浸泡水化
，
可换水
2~3
次或更多次
，
每次浸
水化
hydration
泡至少
0.
5
h
用质量分数
0.5%
的氢氧化钾溶液浸泡鲟鱼样本
，
至少
0.5h,
期间可更换试剂
，
目的是构建
KOH
环境
调节渗透压
osmoregulation
帮助茜素红
S
渗透入骨
用茜素红染色剂浸泡鲟鱼样本
，
至少
24
h,
注意不要染色过度
，
否则未被消化的肌肉会变红
。
其中
，
0.
05
g/L
茜素红
S
溶液的配制
：
0.
05
g
茜素红
S
和
1
000
mL
0.5%
KOH
溶液
硬骨染色
bone
staining
保存
preservation
用蒸馏水清洗样本
，
然后放入甘油体积分数逐渐增加的甘油和
1%
（
质量分数
）
氢氧化钾混合溶液
（
甘
油与
1%
氢氧化钾比例为
1
：
3—
1
：
1
—
3
:
1
）
中浸泡
，
最后保存在纯甘油中
，
每个比例的混合溶液浸泡
时间至少为
24
h
，
期间可更换试剂
第
2
期
高丽楠
，
等
：
施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察
297
2
结果与分析
2.1
施氏鲟骨骼系统的组成
本研究中参照孟庆闻等
［
3
］
及李怀明等
［
II
］
的研
究
，
对施氏寻寻骨骼系统进行了概述和标注
，
其分为
的一半
；
尾鳍为歪尾形
，
尾部椎骨向上弯曲
，
将尾
鳍分为上下两叶
，
基部分叉
，
下叶较发达
，
上叶边
缘有一排棘状鳞
。
2.2
施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统的染色观察
根据鱼类的形态特征
，
鱼类早期发育可分为仔
鱼期
、
稚鱼期和稚鱼期
。
鲟鱼仔鱼期一般指孵化后
至开口摄食的阶段
，
稚鱼期则指开口摄食至鱼体表
主轴骨骼
(
axial
skeleton)
和附肢骨骼
(
appendic
?
ular
skeleton)
两部分
，
主轴骨骼由头骨
(
skull)
、
脊柱
(
vertebral
column
)
和肋骨
(
rib)
组成
，
附
五列骨板形成的阶段
。
也有人把仔鱼称为前期仔
鱼
，
稚鱼则称为后期仔鱼
。
幼鱼则是指体表五列骨
肢骨骼由带骨
(
girdle)
、
支鳍骨骼
(
pterygiophore)
和鳍条
(
fin-ray)
组成
。
2.1.1
主轴骨骼
脑颅
(
neurocranium
)
:
施氏鲟
幼鱼的脑颅较为宽长
，
整体呈纺锤形
，
内层由整块
的软骨构成
，
而外层覆盖硬骨质膜片
，
且在吻部至
鼻孔背面有许多吻部小骨片
。
主要膜骨骨片有鼻窝
上方一对长方形的额骨
，
两额骨间夹有
2
小块近椭
圆形的中额骨
，
其后方中央有一对颇长的顶骨
，
顶
骨外侧是一对长方形的翼耳骨
；
后端枕骨区有正中
的上枕骨和两侧的外枕骨
，
外枕骨后外侧为后颖
骨
；
眼窝上方为眶上骨
，
其前后及腹面围有小的围
眶骨
。
脑颅腹面正中有发达的副蝶骨
，
侧面有一系
列的鳃盖骨片
。
咽颅
(
splanchnocranium)
：
施氏寻寻咽颅骨化程
度较少
，
大部分为软质骨
。
咽颅分为颌弓
(
arcus
mandibularis)
、
舌弓
(
arcus
hyoideus
)
和鳃弓
(
ar
?
cus
branchialis)
3
个区域
。
施氏寻寻的颌弓分背腹两
面
，
背面为上颌
，
腹面为下颌
，
上颌由上颌骨
、
方
轭骨和颚方软骨组成
，
下颌由齿骨
、
关节骨和米克
尔氏软骨组成
。
施氏鲟的舌弓由舌颌骨
、
关节骨
、
角舌骨
、
下舌骨和间舌骨等构成
。
施氏鲟主要有
5
对鳃弓
。
脊柱
(
columna
vertebralis)
：
施氏寻寻的脊索呈
圆柱形
，
贯穿全身
，
终生存在
，
位于脊髓的腹面
,
没有真正的椎体
，
周围被加厚的脊索鞘包围
。
按形
态不同可将脊柱分为躯干部脊柱和尾部脊柱
。
肋骨
位于躯干部脊柱的两侧
，
每根肋骨一端与脊柱的横
突相连
，
另一端游离
。
2.1.2
附肢骨骼
施氏鲟的肩带位于脏颅的后方
两侧
，
支持胸鳍
，
由膜质的上匙骨
、
匙骨
、
乌喙
骨
、
乌喙部软骨和肩胛部软骨组成
。
背鳍位于尾部
的背侧
，
比臀鳍略前
，
与身体垂直
，
呈三角形
；
臀
鳍位于腹面正中央
，
前缘正对背鳍中部
，
距肛门较
远
，
鳍与身体背腹面平行
；
胸鳍小呈圆形
［
I8
］
,
位
于头后体腹的两侧
，
与身体垂直相交
；
腹鳍位于肛
门前的腹部两侧
，
与身体垂直相交
，
长度仅为胸鳍
板已长至尾柄基部
，
外观上具备成鱼体型的鲟
鱼
［
I9-20
］
2.2.1
仔鱼期
刚孵化
(
图
1)
的仔鱼长
(
11.
49
土
0.
10)mm,
头部较小
，
身体纤细透明
，
卵黄囊呈
椭圆形
，
原始鳍褶将躯干部和尾部分开
，
口和鳃裂
还未形成
，
嗅觉
、
味觉等感觉器官也未发育
，
但可
见有色眼睛
，
此阶段不存在硬骨元件
。
5
日龄
(
图
2)
仔鱼全长
(17.
21
±0.20)
mm,
存在的骨骼元件主要集中在头部
，
头骨及身体后半
部分的色素沉积明显增多
。
吻部清晰可见
，
前端有
须
4
根
。
眼睛呈深色
，
哑铃形状的鼻孔出现
。
鳃盖
尚未将鳃全部覆盖住
，
鳃丝露出鳃盖
。
各鳍均已形
成
，
卵黄囊消耗产生的残留物在螺旋瓣后段可见
。
脊索呈圆柱形
，
贯穿全身
。
2.2.2
稚鱼期
10
日龄
(
图
3
)
稚鱼全长
(21.97±0.
30)
mm,
鱼体已经开口摄食
，
身体各
部分骨骼发育更加完善
。
出现了新的形态特征
，
背
骨板及各鳍的幅状软骨形成
，
卵黄囊明显消失
，
鳃
盖清晰可见
，
舌弓的角舌骨
、
鳃弓的角鳃软骨也是
本阶段可观察到的结构
。
视网膜部分呈金色
，
身体
各部分色素明显增多
。
15
日龄
(
图
4)
稚鱼全长
(
22.
45
±0.
60)
mm
,
咽颅发育良好
，
牙齿
、
侧骨板形成
。
尾部的椎骨末
端向背上方弯曲
，
形成歪型尾
。
20
日龄
(
图
5)
稚鱼全长
(
23.20±2.00)mm,
身体各部分骨骼基本形成
，
形态上无明显变化
。
骨
骼骨化过程在本阶段逐渐开始
，
上颌骨
、
齿骨及牙
齿最先骨化
。
22
日龄稚鱼全长
(
23.75±2.00)mm,
此阶段未
发现头部及躯干部的重大变化
。
24
日龄
(
图
6)
稚鱼全长
(
26.
14
±4.
00)
mm
,
形态上无明显变化
。
顶骨
、
后颖骨
、
下鳃盖骨
、
肩
胛骨及背骨板外侧部分开始骨化
。
26
日龄
(
图
7)
稚鱼全长
(
32.
36±3.
00)
mm
,
形态上无明显变化
。
翼耳骨
、
锁骨
、
匙骨开始骨化
。
298
大连
海洋大
学学报
第
36
卷
图
1
施氏鲟孵化后
Od
骨骼发育
Fig.
1
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens
?
er
schrenckii
O
day
post
hatching
(
DPH
)
B
C
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
c
—
腹面观
；
pq
—
腭方软骨
；
me
—
米克
尔氏软骨
。
A
—
—
side
view
；
B
—
—
dorsal
view
；
C
—
—
ventral
view
；
pq
—
—
palatoquad
?
rate
；
mc
一
Meckel\'s
cartilage.
图
2
施氏鲟孵化后
5d
骨骼发育
Fig.
2
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
5
DPH
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
腹面观
；
ds
—
背骨板
；
r
—
幅状软
骨
；
ch
—
角舌骨
；
cb
—
角鳃软骨
°
A
—
—
side
view
；
B—
—
dorsal
view
；
C
—
—
ventral
view
；
ds
—
—
dorsal
scute
；
r
—
—
radialium
；
ch
—
—
ceratohyale
；
cb
——
ceratobranchial.
图
3
施氏鲟孵化后
1Od
骨骼发育
Fig.
3
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
1O
DPH
28
日龄
（
图
8
）
稚鱼全长
（
36.
83±4.00
）
mm,
形态上无明显变化
。
颊骨
、
额骨
、
胸鳍硬棘开始骨
化
。
30
日龄
（
图
9
）
稚鱼全长
（
39.
75
±4.
00
）
mm,
器官分化完全
，
外观与成鱼相似
，
出现了一些新的
幼体特征
，
如纵向排列的骨板
、
腹面扁平的身体
、
细长的触须及歪型尾等
。
围眶骨
、
侧骨板开始骨化
，
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
腹面观
；
ls
—
侧骨板
；
t
—
牙齿
。
A
—
side
view
；
B
—
dorsal
view
；
C
—
ventral
view
；
ls—
lateral
scute
；
t
一
teeth.
图
4
施氏鲟孵化后
15
d
骨骼发育
Fig.
4
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
15
DPH
A
一
侧面观
；
B
一
背面观
；
C
一
腹面观
；m
一
上颌骨
；
d
—
齿骨
。
A
—
side
view
；
B
—
dorsal
view
；
C
—
ventral
view
；
m
—
maxilla
；
d
—
dentary.
图
5
施氏鲟孵化后
2Od
骨骼发育
Fig.
5
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
2O
DPH
A
—
side
view
；
B
—
dorsal
view
；
C
—
ventral
view
；
p
—
parietal
；
pt
—
posttermporal
；
so
—
—
suboperculum
；
s
——
scapula.
图
6
施氏鲟孵化后
24
d
骨骼发育
Fig.
6
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
24
DPH
背骨板基本完成骨化
。
2.2.3
幼鱼期
40
日龄
（
图
10
）
幼鱼全长
（
76.
26
土
第
2
期
高丽楠
，
等
：
施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察
299
4.00)
mm,
骨骼基础框架基本完成发育
，
各器官
分化完全
，
外形向成体过渡
。
尾部椎骨向上弯曲,
；
；
理触
IT
将尾鳍分为上下两叶
，
基部分叉
，
下叶较发达
，
上
1
mm
A
叶边缘有一排棘状鳞
，其下为背辐状软骨
。吻部小
pte
骨片
、
腹骨板
，
以及腹鳍
、
臀鳍
、
背鳍
、
胸鳍最外
侧幅状鳍条均已发生骨化
。
50
日龄
(
图
11
)
幼鱼全长
(
105.
32±
b
clv
5.
00)mm,
身体各部分进一步发育
，
未见新骨化
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
腹面观
；
cl
—
匙骨
；
clv
—
锁骨
;
pte
—
翼耳骨
。
A
—
side
view
；
B
—
dorsal
view
；
C
—
ventral
view
；
cl
—cleithrum
；
clv
—
—
clavicle
；
pte
—
—
pterotic
bone.
图
7
施氏鲟孵化后
26
d
骨骼发育
Fig.
7
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
26
DPH
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
腹面观
；
f
—
额骨
；
j
—
颊骨
；
sp
—
棘
。
A
一
side
view
；
B
一
dorsal
view
；
C
一
ventral
view
；
f
—
frontal
；
j
—
ju
?
gal
；
sp
一
spina.
图
8
施氏鲟孵化后
28
d
骨骼发育
Fig.
8
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
28
DPH
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
腹面观
；
c—
围眶骨
。
A
—
—
side
view
；
B—
—
dorsal
view
；
C
—
—
ventral
view
；
c
—
—
circumorbital.
图
9
施氏鲟孵化后
30
d
骨骼发育
Fig.
9
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Acipens-
er
schrenckii
30
DPH
骨骼
。
A
1
mm
B
C
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
尾鳍发育
；
vs
—
腹骨板
；
or
—
吻部
小骨片
；
fu
一
棘状鳞
：
fr
一
鳍条
。
A
—
side
view
；
B
—
dorsal
view
；
C
—
caudal
fin
development
；
vs
—
ventral
scute
；
or
一
ossiculi
rostralia
；
fu一
fulcra
；
fr
一
fin
ray.
图
10
施氏鲟孵化后
40
d
骨骼发育
Fig.
10
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Aci-
penser
schrenckii
40
DPH
图
11
施氏鲟孵化后
50
d
骨骼发育
Fig.
11
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Aci-
penser
schrenckii
50
DPH
3
讨论
3.1
施氏鲟骨骼系统发育的功能适应性
骨骼发育起始于骨化前软骨的形成
，
并且与仔
稚幼鱼不同时期的功能需求密切相关
［
21
］
o
饥饿和
被捕食是影响仔稚幼鱼存活的主要影响因素
［
22-25
］
,
因此
，
在长期的进化过程中形成了与生存相关的器
官优先发育的发育模式
［
26
］
。
本研究中
，
在施氏鲟仔鱼期
，
与摄食和呼吸相
关的米克尔氏软骨
、
腭方骨
、
角舌骨
、
角鳃软骨已
经形成
，
且在仔鱼期未观察到任何骨化骨骼
。
伴随
着外源性摄食的开始
，
稚鱼期进入快速生长阶段,
脑颅
、
咽颅及附肢骨骼迅速发育
。
施氏鲟
20
日龄
时第一次观察到骨化的骨骼
，
为上颌骨
、
齿骨及牙
齿
，
大大增强了鱼苗的摄食能力
，
脑颅其他骨骼的
300
大连
海洋大
学学报
第
36
卷
骨化在此阶段刚刚开始并逐步增加
。
24
日龄时
，
施氏鲟稚鱼顶骨
、
后颖骨
、
下鳃盖骨及背骨板外侧
（
图
12
、
图
13
）
,
2019
年繁育的施氏鲟在
30
日龄
时才观察到骨化的骨骼
，
而本研究中在
20
日龄时
就观察到骨化的骨骼
。
由此可见
，
即使同种鲟鱼其
部分开始骨化
，
头骨及背骨板的骨化在早期发育中
具有重要的防御作用
［
27
］
o
附肢是鱼体游泳运动重
要的协调器官
，
施氏鲟稚鱼肩胛骨
、
胸鳍硬棘
、
侧
骨板分别在
26
、
28
、
30
日龄时开始骨化
，
此时游
泳能力极大提高
，
躲避敌害
、
主动寻找食物和攻击
骨化时间也会因环境或遗传因素等有所差异
，
本研
究中提供了施氏鲟早期骨骼发育进程的大致时间范
围
。
捕食者能力均随之提高
。
进入幼鱼期
，
鱼体骨骼基
础框架基本完成发育
，
吻部小骨片
、
腹骨板
，以及
腹鳍
、
臀鳍
、
背鳍
、
胸鳍最外侧幅状鳍条均已发生
A
1
mm
骨化
，
鱼体活动更加灵活多变
，
能够伏击或跟踪饵
料鱼
，
遇到敌害后也能逃避藏匿
［
28
］o
3.2
施氏鲟骨骼系统发育与其他鲟鱼的比较
头骨骨化较为复杂
，
本研究中
，
施氏鲟在
20
日龄时第一次观察到骨化的骨骼
，
为上颌骨
、
齿骨
和牙齿
，
随后头部其他部位的骨骼相继骨化
，
且骨
化的牙齿在
26
日龄时就已消失
，
施氏鲟在仔稚鱼
时期存在犬齿状牙齿
［
29-30
］
,
成体则没有任何牙
齿
［
31
］
。
施氏鲟与波斯鲟
Acipenser
persicus
［
15
］
A
西伯
利亚鲟
A.
baerii
［
32
］
的骨化部位及顺序相一致
，
但波
斯鲟骨化时间较早
，
在
12
日龄时就已经观察到上
述骨骼的骨化
。
骨板骨化顺序从背骨板开始
，
然后是侧骨板
,
最后是腹侧骨板
，
且由远端向近端逐渐骨化
。
本研
究中
，
施氏鲟背骨板在
24
日龄时开始骨化
，
侧骨
板和腹骨板分别在
30
、
40
日龄时观察到骨化
。
西
伯利亚鲟
［
33
］
骨板骨化的时间与施氏鲟相近
，
背骨
板
、
侧骨板和腹骨板分别在
25
、
31
及
37
日龄时骨
化
。
杂交鲟
Huso
huso
X
Acipenser
ruthenus
［
34
］
骨板的
骨化晚于上述两种鲟鱼
，
背骨板在
59
日龄时开始
骨化
，
侧骨板和腹骨板均在
91
日龄时观察到骨化
。
各鳍骨化方式一致
，
均由基部向末梢骨化
。
本
研究中
，
施氏鲟
5
日龄时各鳍均已形成
，
40
日龄
时观察到各鳍鳍条的骨化
。
而在杂交鲟
H
.
huso
X
A.
ruthenus
［
34
］
中
，
背鳍和臀鳍在
4
日龄时形成
，
胸
鳍在
6
日龄时出现
，
上述各鳍鳍条均在
59
日龄时
骨化
，
腹鳍
、
尾鳍在
10
日龄时形成
，
鳍条在
91
日
龄时骨化
。
由此可见
，
不同种类的鲟鱼
，
其骨骼骨化的时
间节点有所差异
，
可能是生长环境
［
35
］
、
饵料投喂
、
鱼卵大小与质量
［
36
］
及地理隔离所造成的种族差异
等原因所导致⑶
］
。
此外
，
本次繁育的施氏鲟骨骼骨化时间相比
2019
年作者在前期预试验中繁育的施氏鲟早
10
d
JI
0
“
c
*
B
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
腹面观
。
A
—
—
side
view
；
B
—
—
dorsal
view
；
C
—
—
ventral
viewd.
图
12
施氏鲟孵化后
25
d
骨骼发育
(
2019
年
)
Fig.
12
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Aci
?
penser
schrenckii
25
DPH
(
2019
)
A
—
侧面观
；
B
—
背面观
；
C
—
腹面观
。
A
—
—
side
view
；
B
—
—
dorsal
view
；
C
—
—
ventral
viewd.
图
13
施氏鲟孵化后
30
d
骨骼发育
（
2019
年）
Fig.
13
Skeletal
development
of
Amur
sturgeon
Aci
?
penser
schrenckii
30
DPH
（
2019
）
本研究中采用软骨-硬骨双染色技术确定施氏
鲟骨骼骨化的时间
，
但在发育早期
，
骨中钙量不
足
，
可能无法通过茜素红染色
［
34
］
,且进入稚鱼期
后
，
肌肉并不能完全被清除
，
因此
，
作者推测骨化
开始的时间可能比染色观察到的时间更早一些
，
今
后还需进一步对不同发育阶段的软骨和硬骨组织进
行相关功能基因的定量分析
，
确定其出现及骨化时
间
。
4
结论
1
）
本研究中首次对施氏鲟仔稚幼鱼进行了不
第
2
期
高丽楠
，
等
：
施氏鲟仔稚幼鱼骨骼系统发育观察
Stain
Technolog^^,
1977,52(4)
：
229-232.
[15]
301
同发育时期骨骼染色观察
。
施氏鲟骨骼发育起始于
孵化后
，
且在发育过程中
，
与呼吸
（
颌弓
）
、
摄食
ESHAGHZADEH
H,AKBARZADEH
A,YARMOHAMMADI
M,
et
ogenesis
in
the
Persian
sturgeon
Acipenser
persicus
and
（
鳃弓）
和游泳能力
（
鳍
）
相关的骨骼优先发育,
骨骼骨化顺序与发育顺序大概一致
。
2
）
仔鱼期未观察到任何骨化骨骼
。
its
correlation
with
gene
expression
of
vitamin
K-dependent
pro
?
teins
during
larval
development
[
J
]
.
Journal
of
Fish
Biology，
2018,92(2)
：
452-469.
3
）
稚鱼期进入快速生长阶段
，
20
日龄时观察
[16]
WALKER
M
,
KIMMEL
C.
A
two
-
color
acid
-
free
cartilage
and
bone
stain
for
zebrafish
larvae
[
J]
.Biotechnic
&
Histochemistry
，
到开始骨化的骨骼
，
为上颌骨
、
齿骨及牙齿
。骨化
主要集中在
24~30
日龄
。
进入幼鱼期
，
鱼体骨骼
基础框架基本完成发育
，
鱼体活动更加灵活多变
。
4
）
施氏鲟骨骼骨化时间与养殖环境
、
遗传等
2007,82(1)
：
23-28.
[17]
梁小毛
.
小体鲟骨骼系统解剖研究
[
D].
北京
：
北京师范大学
，
2019.
[18]
ARTYUKHIN
E
N
,
VECSEI
P
,
PETERSON
D
logy
and
因素有关
。
本研究中观测到不同批次施氏鲟骨骼骨
化起始时间相差
10
do
参考文献
：
[1]
BEMIS
W
E
,
KYNARD
on
rivers
:
an
introduction
to
aci-
penseriform
biogeography
and
life
history[
J]
.
Environmental
Biolo?
gy
of
Fishes,1997,48(
1/2/3/4)
：
167-183.
[2]
苏锦祥
，
孟庆闻
,
唐宇平
.
团头鲂骨骼系统的发育
[J].
水生生物
学报
,1989,13(
1):1-14.
[3]
孟庆闻
，
苏锦祥
，
李婉端
.
鱼类比较解剖
[M].
北京
:
科学出版
社
,1987.
[4]
西南师范学院生物系动物教研组
.
白鲟鱼
Psephurus
gladius
(Maztens)
的解剖
[J].
西南师范学院学报
,1960(2)
：
79-85,
122-129.
[5]
李云
，
刁晓明
，
陈林
.
白鲟骨骼系统的补充修正
[J].
西南农业大
学学报
(
自然科学版
),1997,19(1)
：36-46.
[6]
HILTON
E
J
，
GRANDE
L
，
BEMIS
W
E.
Skeletal
anatomy
of
the
Shortnose
sturgeon
,
Acipenser
brevirostrum
Lesueur
,
1818,
and
the
systematics
of
sturgeons
(
Acipenseriformes
，
Acipenseridae
)
[
J
]
.
Fieldiana
Life
&
Earth
Sciences
,2014,3(3)
:
1-168.
[7]
西南师范学院生物系动物教研组
.
黄鲟鱼
(
Acipenser
dabnynus
Deumaril)
的解剖
[J].
西南师范学院学报
,1960(2)
：
72-78,
116-121.
[8]
郭长江
，
赵文
，
石振广
，
等
.
达氏鲤幼鱼骨骼系统解剖研究
[J].
大连海洋大学学报
,2016,31(3)
：
301-306.
[9]
罗泉笙
，
何学福
.
中华鲟的解剖
[J].
西南师范学院学报
(
自然科
学版
),1980(2)
：
7-30.
[10]
刘钊
，
赵仲孟
,
杨世勇
，
等
.
西伯利亚鲟幼鱼骨骼系统解剖研究
[J].
水生生物学报
,2019,43(1):117-122.
[11]
李怀明
，
宁惠兰
，
袁敬坤
.
北鲟
Acipenser
schrencki
Brandt
骨骼系
统解剖
[J].
哈尔滨师范学院学报
(
自然科学版
)
，
1964(00)
：
157-168.
[12]
HANKEN
J
,
WASSERSUG
visible
skeleton[J
]
.Functional
Photography,
1981,16(4)
：
22-26.
[13]
TAYLOR
W
R
,
VAN
DYKE
G
C
.
Revised
procedures
for
staining
and
clearing
small
fishes
and
other
vertebrates
for
bone
and
carti
?
lage
study
[
J
].
Cybium
,
1985,9(2)
:
107
-
119.
[14]
DINGERKUS
G
,
UHLER
L
D.
Enzyme
clearing
of
Alcian
blue
stained
whole
small
vertebrates
for
demonstration
of
cartilage[
J]
.
ecology
of
Pacific
sturgeons[
J]
.Environmental
Biology
of
Fishes
，
2007,79(3/4)
：
369-381.
[19]
谢从新
.
鱼类学
[M].
北京冲国农业出版社
,2010.
[20]
张彤晴
，
葛家春
,
盛建明
，
等
.
小体鲟仔
、
稚幼鱼生物学及苗种
培育技术初步研究
[J].
河海大学学报
(
自然科学版
)
，
2002,
30(sup)
：
114-117.
[21]
吕雪娇
.
大菱鲆
(
Scophthalmus
maximus
)
和鞍带石斑鱼
(Epi-
nephelus
lanceolatus
)
生长特性以及骨骼发育与畸形研究
[
D]
.
青岛
：
中国科学院大学
(
中国科学院海洋研究所
)
，
2018.
[22]
HOUDE
E
early
life
dynamics
and
recruitment
variability
[J]
.American
Fisheries
Society
Symposium
,
1987,2
:
17-29.
[23]
BAILEY
K
M
,
HOUDE
E
ion
on
eggs
and
larvae
of
ma
?
rine
fishes
and
the
recruitment
problem[
J]
.
Advances
in
Marine
Biology,1989,25
：
1-83.
[24]
FUIMAN
L
A.
Early
life
history
of
fish
:
an
energetics
approach
[J].
Reviews
in
Fish
Biologyand
Fisheries
,
1992,2(4)
：
348
-
349.
[25]
IGUCHI
K,
MIZUNO
N
.
Early
starvation
limits
survival
in
am-
phidromous
fishes
[J].
Journal
of
Fish
Biology,1999
,54(4)
：
705-712.
[26]
GAGNAT
M
R
，
WOLD
P
A
，
BARDAL
T
，
et
tric
growth
and
development
of
organs
in
ballan wrasse
(
Labrus
bergylta
As-
canius
,1767)
larvae
in
relation
to
different
live
prey
diets
and
growth
rates
[J].
Biology
Open,2016,5(9)
：
1241-1251.
[27]
MABEE
P
M
,
CROTW\'ELL
P
L,BIRD
N
C,et
ion
of
median
fin
modules
in
the
axial
skeleton
of
fishes[
J]
.The
Journal
of
Experimental
Zoology
，
2002
，
294(
2)
：
77-90.
[28]
熊玉宇
.
蹶摄食行为发育
[
D].
北京
：
中国科学院大学
,2012.
[29]
马境
,
章龙珍
，
庄平
，
等
.
施氏鲟仔鱼发育及异速生长模型
[J].
应用生态学报
,2007,18(
12)
：2875-2882.
[30]
韩骥
，
王云山
,
李文龙
，
等
.
史氏鲟的早期发育异速生长模式及
生态学意义
[J].
河北渔业
,2016
(11)
：
31-36.
[31]
中国科学院中国动物志编委会
.
中国动物志
[M].
北京
:
科学
出版社
,1998.
[32]
WARTH
P,HILTON
E
J,NAUMANN
B,et
pment
of
the
skull
and
pectoral
girdle
in
Siberian
sturgeon
，
Acipenser
baerii
，
and
Russian
sturgeon
，
Acipenser
gueldenstaedtii
(
Acipenseriformes
：
Acipenseridae)
[J]
」
ournal
of
Morphology
,2017,278
(3)
：
418
-
442.
[33]
LEPREVOST
A
,
AZAIS
T,TRICHET
M,et
ral
develop
?
ment
and
ossification
in
the
Siberian
sturgeon
(
Acipenser
baerii)
，
302
大连海洋大学学报
with
new
insights
on
bone
histology
and
ultrastructure
of
vertebral
第
36
卷
Journal
of
Fish
Biology,2012,81(6)
:
1985-2004.
[35]
elements
and
scutes
[
J
]
.
The
Anatomical
Record
：
Advances
in
Integrative
Anatomy
and
Evolutionary
Biology,2017,300
(
3
)
：
管士成
.
环境因素对鱼类生长速度的影响
[J].
养殖技术顾问
，
2013(10)
：
229.
437-449.
[36]
殷名称
.
鱼类早期生活史研究与其进展
[J].
水产学报
,1991,
15(4)
：
348-358.
[34]
ZHANG
X,
SHIMODA
K
,
LRA
K,
et
pmental
structure
of
the
vertebral
column
，
fins
，
scutes
and
scales
in
bester
sturgeon
，
a
hybrid
of
beluga
Huso
huso
and
sterlet
Acipenser
ruthenus
[J].
[37]
郑珂
,
岳昊
,
郑攀龙
，
等
.
海水养殖鱼类仔
、
稚鱼骨骼发育与畸
形发生
[J].
中国水产科学
,2016,23(1)
：
250-261.
Observation
of
skeletal
system
development
of
larval
and
juvenile
Amur
sturgeon
Acipenser
schrenckii
GAO
Linan
1
，
2
,
HU
Hongxia
2
*
,
WANG
Wei
2
,
DONG
Ying
2
,
WU
Lixin
1
(1.
College
of
Fisheries
and
Life
Scence
,
Dalian
Ocean
Lniversity
,
Dalian
116023
,
China
；
2.
Key
Laboratory
of
Fishery
Biotechnology,
Beijing
Fisher
?
ies
Research
Institute
,
Beijing
100068,
China)
Abstract
:
In
order
to
improve
the
understanding
of
skeleton
growth
and
development
of
Acipenseriformes
,
and
to
explore
the
adaptive
evolution
of
the
only
existing
chondrostean
，
skeletal
system
of
Amur
sturgeon
Acipenser
schrenckii
was
continuously
observed
from
newly
hatched
larvae
to
juvenile
fish
using
the
cartilage-bone
double
stai
?
ning
technique
,
and
the
growth
and
development
schedule
was
summarized
according
to
the
ossification
time
of
skeletons.
No
obvious
differentiation
of
bone
elements
was
observed
in
the
newly
hatched
larvae
，
and
skeletal
ele
?
ments
were
mainly
distributed
only
on
the
head
，
and
then
notochord
and
fins
，
without
ossified
bones.
The
juvenile
Amur
sturgeon
turned
into
rapid
growth
stage
，
neurocranium
，
splanchnocranium
and
appendicular
skeleton
devel
?
oped
rapidly
,
and
the
skeleton
in
all
parts
of
the
body
were
basically
formed
at
10-15
days
post
hatched
(
dph
).
At
20
dph
，
the
maxilla
，
dentary
and
teeth
began
to
ossify
；
at
24
dph
，
the
parietal
，
posttermporal
，
suboperculum
，
scapula
and
the
lateral
part
of
dorsal
scute
appeared
to
begin
to
ossify
；
at
26
dph
，
the
scapula
，
dorsal
scute
was
completely
ossified
，
and
the
pterotic
，
clavicle
and
cleithrum
began
to
ossify
at
the
same
time.
At
28
dph
，
jugal
，
frontal
and
spina
of
the
pectoral
fins
began
to
ossify.
At
30
dph
，
the
postorbital
began
to
ossify
；
the
lateral
scute
was
completely
ossified.
At
the
juvenile
fish
stage
，
the
framework
of
skeleton
was
basically
developed.
The
ossiculi
rostralia
，
ventral
scute
，
and
the
radialia
of
pelvic
fin
，
anal
fin
，
dorsal
fin
，
and
pectoral
fin
were
ossified
complete?
ly.
In
conclusion
，
the
bone
development
of
Amur
sturgeon
began
after
hatching
，
and
the
bones
related
to
breathing
(
arcus
mandibularis)
，
feeding
(
arcus
branchialis)
and
swimming
ability
(
fins)
were
developed
preferentially
dur
?
ing
the
development
，
and
the
order
of
bone
ossification
was
approximately
consistent
with
that
of
development.
The
ossified
bone
was
first
observed
at
20
dph
,
with
the
peak
ossification
at
24-30
dph
,
and
the
ossification
time
being
involved
in
the
breeding
environment
,
heredity
and
other
factors.
In
this
study
,
there
was
10
days
difference
in
the
bone
ossification
initiation
time
in
different
batches
of
artificial
spawning
in
Amur
sturgeon.
Key
words
:
Acipenser
schrenckii
；
larva
fish
；
juvenile
fish
；
young
fish
；
skeleton
development
；
ossify
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骨骼,骨化,发育
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