2024年1月2日发(作者：丰田酷路泽2022款黑武士)
2021,
25(4)
:
45
-48,
51.实用临床医药杂志
Journal of
Clinical
Medicine
in
Practice?45?丙泊酚麻醉对老龄大鼠认知功能
和海马神经元Y氨基丁酸A受体表达的影响
邱洁，孙虎，谢爽，张彩彩，陈磊(海南医学院第二附属医院麻醉科，海南海口
,570311)摘
要：目的
观察丙泊酚麻醉对老龄大鼠认知功能及海马神经元Y氨基丁酸A(GABA)受体表达的影响。方法57只
SD老年大鼠随机分为丙泊酚组和对照组，每组25只。丙泊酚组大鼠腹腔注射1%丙泊酚中/长链脂肪乳注射液6
ml/kg,对
照组腹腔注射等体积的生理盐水。麻醉后1
i进行Moua水迷宫实验，分别采用HE染色和尼氏体染色观察海马区神经细胞
及尼氏体(Ninl体)形态学变化，Western
Bloi检测GABA蛋白量表达。结果
麻醉后，2组大鼠肛温、心率、呼吸频率、血氧饱
和度比较,差异均无统计学意义(P>0.07)o随着实验时间的延长,2组大鼠逃逸潜伏期、总里程数逐渐减小，丙泊酚组大鼠
各时间点逃逸潜伏期、总里程均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.00)o丙泊酚组大鼠穿越平台区域次数、时间小于、短
于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)对照组海马区Nint体存在于细胞浆及树突，染色较深，神经细胞排列整齐，形态规
则；丙泊酚组Nnt体消失，神经细胞数量减少，细胞核破裂、丢失。丙泊酚组大鼠海马GABA蛋白表达量低于对照组,差异有
统计学意义(P<0.05)。结论
丙泊酚对大鼠认知功能有影响，并与海马区GABA的表达相关。关键词：丙泊酚；认知功能；Y氨基丁酸A；神经元；逃逸潜伏期中图分类号：R614；
R
333.
2
文献标志码：A
文章编号：1672-2333(2221
)04-047-04
D0I：
10.7619/jcmp.22221604Effect
of
propofol
on
cognitive
function
and
expression
of
hippocompal
neuronal
y-aminobutyrio
acid
oceptoo
io
aged
rotsQIU
Jic,
SUN
Hu,
XIE
Shuang
,
ZHANG
Caicat
,
CHEN
Let
(Department
of\'
Anesthesiology,
The
Second
J^filiated
Hospital
of
HainanMedical
Universita,
Haikoo,
Hainan,
576311)Abstroci:
Objective
To
oUserve
the
effect
of
pnpofol
ou
counitive
fractiou
ani
expressiou ofhippucampai
aecrouai
YomiaoUutyVa
nciV
(GABA)
naphu
in
nd
rats.
MetOods
Totaliy
57
eli-
eriy
SD
rais
were
ranComiy
diviped
inta
pnuofol
gnup
nC
conaol gnup ,
with
25
rais
in
eacO
gnup.
Rais
in
the
pnpofot
group
were
injectee
with
6
m/kg
1
%
pnpofot
meeiun^joua
cOain
fni
emulsiou
injectiou
taroupg
dbOomirci
cavity ,
while
rats
in
the
cautroU
group
wi
injectee
with
equdi
volume
of
comai
salice throupg
anOominai
ctvity.
Mofis
wateo
maze
expenmedi
wiout
i
1
ddyacesthesia
,
the morpholouic
chdnaes
of
hippocampai
anC
Nisst
boUy
wereby
HEstainina
vC
Nisst
stainina
03.6(0x60，vC
the
expressiou
of
GABA
protein
wds
by
Wesh-eai
blot.
Results
aaesthesia
,
thero
were
ao
sipniUcaCt
diUereaces
in
anai
temperatpro
,
heeriate
,
nspinPre
n-a
anC
blooU
oxygea
satpratiou
bpwqa
the
two
groups
(P
>0.
07)
.
With
the
extea-
siou
of
the
expenmeatai
time ,
the
escaye
lateaca
anC
the
totai
mileage
of
ats
in
both
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de-
creesed
granpaliy ,
anC
the
escane
lateaca
and
the
totai
mileage
of
the
p-s
in
the
prouofot
group
wea
sivniUcantiy
山弐丘!\'
thaa
those
in
the
coutrot
group
(
P
<
0.
07
)
.
Tlie
times
anC
dpratiou
of
p-s
cross?ina
the
platirm
area
in
the
prouofot
group
were
sivniUcontiy
less
and
shoaer
thaa
those
in
the
coutrot
group
(
P
<
0.
07
)
.
Ic
the
coutrot
group
,
Nisst
bouies
were
founC
in
the
cytopUcm
anC
—VUs,
with
deep
stainina
anC
requlav
arranaemeai
of
anv
colts.
Cc
the
prouofbt
group
,
Nisst
bouies
disaypeared
,
the
nambev
of
aervv
ceds
decreased
,
anC
the
nacleas
nptpred
and
iosi.
TFie
expressiou
of
GABA
pro?tein
in
hippocampps
of
the
prouofbt
group
was
sienificentiy
lowen thaC
thai
of
coutrot
group
(P
<
0.
07
)
.
Conclusion
Popofol
has
sg
effect
ou
cognitivv
functiou
in
rais,
whicO
is
related
te
he
expressiou收稿日期：2221
-01 -11
?46?实用临床医药杂志
Journal
of
Clinical
Medicine
in
Practice第25卷of
GABA
in
words
:
papofoi；
coonitive
fuectioc
；
Y-^mieoCutyrie
ccip;
eeuroo
；
escace
latence丙泊酚是常用麻醉药之一，但会引起一些不
良反应［1］0麻醉剂与患者手术后认知障碍
（POCD）密切相关。研究UT表明，丙泊酚可通
物密封信封内，操作人员随机分配。将大鼠放入
麻醉箱，置于37七环境中连接麻醉机，以混有
60%
的
体
为
体
体，过磷酸化海马区Tau蛋白诱导POCD的发生。目
速（mL/min）
=
0.
25
X
体质量（,）°1.2.2生命体征记录：记录每只大鼠直肠温度、
前,丙泊酚导致认知功能障碍的机制尚不清楚，有
学者⑷认为海马神经元Y氨基丁酸A
（GABA）受
心率、呼吸频率和血氧饱和度（SpO2）o采用商用
体
传感器测
大鼠
。使用啮齿动物脉体与认知功能关系密切。本研究观察丙泊酚麻醉
对老龄大鼠认知功能和海马GABA受体的影响，01材料与方法1.1实验动物选取50只清洁级Wiva大鼠，鼠龄22
-22月
龄,体质量360
-422 n,雌雄不限,由长沙市天勤
生物技术有限公司生产提供，许可证号为SCXK
（湘）2214
-0011,使用许可证号为SYXK（湘）
2214
-000o动物处理及实验过程得到海南医学
院动物关怀及使用委员会的许可（IACUC0023）
°
实验研究过程中严格遵守3
R原则。1.2
主要仪器及试剂呼吸麻醉机（武汉医用仪表有限公司），呼吸
监护仪（Datex
Engstorm仪器公司，芬兰）°商用
体温传感器（PhPips公司，德国），啮齿动物脉搏
血氧计和心率监测仪（Datex
Engstorm仪器公司，
芬兰）0RPMI-1444培养液、胰蛋白酶（GiUce公司，美
国），兔抗鼠GABA单克隆抗体、辣根过氧化物酶
（HRP）标记的第二抗体（Sigma公司，美国）；丙
泊酚（批号090822,河北九派制药有限公司）；酶
标仪SpectraMax
M5P［上海美谷分子仪器（上海）
有限公司］，倒置相差显微镜（上海苍茂实业有限
公司），低温高速离心机（长沙湘智离心机仪器有
限公司）,SDS-PAGE凝胶电泳及转移装置（上海
优宁维生物科技股份有限公司），LAS440凝胶成
像系统（GE公司，美国）1.1
实验方法1-2.1动物分组及处理：所有实验动物在动物
房进行适应性饲养1周。55只大鼠随机分为丙
泊酚组与对照组，每组25只。丙泊酚组大鼠腹腔
注射1%丙泊酚中/长链脂肪乳注射液0
mL/kn,
对照组腹腔注射等体积的生理盐水。所有注射药搏血氧计和心率监测仪评估心率和SpO2o通过
计
大鼠的
动的
记
速
。麻
醉
后,
大鼠
放置
上的。1.2.2认知功能检测：实验完毕后选取1只大
鼠，清醒后继续饲养48
h,实施Morric水迷宫实
验。迷宫按照顺时针分为1、11、皿、1?部分。水
池和平台黑色，平台放置于第n部分。池水染成
黑色，温度保持在26
°C,开启设备。软件自动记
录大鼠活动行迹，逃逸潜伏期定义为下水至找到
平台的时间，游泳路程定义为总里程，实验进行
5
do实验结束后的第2天移除平台，大鼠从I部
分下水，记录大鼠12
s内穿越平台区域次数和
时。1.2.2
苏木精-伊红染色（HE）及尼式染色：实
验完毕后，解剖出脑海马组织，制备石蜡切片
（0
pn）,脱蜡、脱水，尼氏染色液染色,蒸憎水
洗涤，脱水。光学显微镜下观察神经细胞形态及
尼氏体。1.3.5
Western
Bloi检测GABA蛋白量表达：实
验完毕后1
d选取0只大鼠，解剖出脑海马组织,
加入2
mL
RIPA组织裂解液，匀浆，冰浴30
min,
40
C下550
xg离心5
min,吸去上层液体，超声
波破核，再次离心，取上层液体1
pL待测。配
胶，上样，电泳，转膜，切膜，封闭液封闭1
h,逐次
兔抗鼠GABA单克隆抗体、HRP标记的二抗。
Bio-Rat成像仪曝光成像,Image
LaU
Software测
，
标蛋白
照蛋白表
对表达
o1.2
统计学处理采用SPSS
17.2软件处理数据，计量资料采
用（（土
s）表示，组间比较行t检验，计数资料采
用％表示，组间比较行X2检验。P<0.05为差异
有统计意义。
第4期实用临床医药杂志
Jocmai
of
Climcai
MeUicinx
in
Practice?47?2结果2.2
2组大鼠肛温、心率、呼吸频率、SpO2均呈现一定的
，而后
恢复
，但2组各时间点
2组生命体征比较2组麻醉
时
上述指标
,
无统计学意义(P〉2.25)o
、心率、呼吸频率、SpO2见图1°66—对照组
??…丙泊酚组580
0
10
20
30
40
50
60时间/min
A：
SpO2变化；B：呼吸频率变化；C：肛温变化；D：心率变化。D图1
2组不同时间点血氧饱和度、呼吸频率、肛温及心率比较2.2丙泊酚对大鼠水迷宫实验逃逸潜伏期的
期、总里程数逐渐减小，丙泊酚组大鼠各时间点逃、
影响
对照组，
统计学意随着实验时间的延长，2组大鼠逃逸潜伏
义/《。.。厶)。见表1、2。表1
2组大鼠不同时间点逃逸潜伏期比较(%±5)组别对照组丙泊酚组1
2
34
5
36.15
±5.1356.72
±6.04*31.29
±4.2322.03
±3.0146.39
±5.32*23.56
±2.0232.62
±3.04*1.263±220231.25
±2.26*51.26
±4.35*与对照组比较,*P
<0.
05。表2
2组大鼠不同时间点总里程比较)4
组别对照组丙泊酚组1
2
213.22
±24.1331.2202±13205d231.65
±19.26150.39
±12.65609.75
±39.33*12.206±1222542.95
±32.23\'706.39
±42.62*623.36
±41.23*646.12
±33.12*与对照组比较,*P
<0.
05。2.2丙泊酚对大鼠穿越平台区域次数和时间的影响
(39.02
±4.73)
c,差异有统计学意义(PvOe)。丙泊酚组大鼠
区
区
、时间分别为2.4
2组大鼠海马CAI区HE染色及尼式染色(3.20
±0.22)次、(17.15
±1.36)
c,对照组大鼠穿对照组海马区Nisst体
染色
，神经细胞
细胞浆及树突,，形态
；丙泊酚、时间分别为(2.36
±1.03)次、
?48?实用临床医药杂志
Journvi
of
Climcvi
Medicicc
in
Pnctice第25卷组Nisst体消失,神经细胞数量减少,细胞核破裂、丢失。见图2。A：丙泊酚组大部分Nisst体在神经细胞中消失（箭头1）,神经细胞核丢失（箭头2）；
B：对照组神经细胞胞浆内的Nisst体。
图2
2组大鼠海马CAI区HE染色及尼式染色结果（放大倍数20倍）2.5
丙泊酚对大鼠海马GABA蛋白的影响
统计学意义（PvO.O-）,表明丙泊酚对大鼠认
对丙泊酚组大鼠海马GABA蛋白表达
照组,差异有统计学意义（PvO.O-）。见图3。对照组
知功能具
的干扰。〔6一8认为，丙泊酚可激活GABA,抑制神
,
行丙泊酚组经细胞的信号传导,导致认知功能
性和逆行性遗忘等表现。GABA是海马区中重要
的抑
神经递质，研究[/-0「
，阿尔兹海默病、帕金森综
等疾病海马区
表达或GABA能受损。
I】1
AGABA低B-actin
M，海马区域中的GABA受体与认知功能
的联系。研口2表明，老年痴呆
及轻度认知GABA水
显
。
观察丙泊酚麻醉后大鼠海马区域GABA受体蛋白的表达，结果表明,
丙泊酚组大鼠海马GABA蛋白表达
对照组,统计学意义（P
<0.05）,提示GABA受体与
丙泊酚
的认知功能
Nisst体正
的联
。神经元胞体和
中，参蛋白质
。神经元胞体内Nisst体大
：在
表明神经元
A：
Western
Bloi结果；B：
2组GABA蛋白量表达比较。
蛋白质的功能较强；，神经与丙泊酚组比较，*P<0.05。图3
Western
Bloi检测2组大鼠海马组织中元功能
时，Nisst体
或
。研[⑶表明，人记忆功能与海马部分蛋白质分泌、
触
号传递
。
GABA蛋白量表达显
，
丙泊酚。3讨论组大鼠海马区神经元.Nisst体受损，考虑丙泊酚导
的认知
能与Nisst体功能
丙泊酚属
用的静脉麻醉剂,具
：效快、苏醒时间短、副作用小等优势⑸。丙泊酚可
抑制海马CAI区细胞突触的长时程增强
良P0CD⑹。本实验对大鼠进行了腹腔注射丙泊酚,
观察大鼠的认知功能，结果表明，丙泊酚组大鼠各
综上所述，丙泊酚麻醉对大鼠认知功能具有
一定的影响，可能与海马区GABA受体的表达有
关,其具体机制仍待进一步研究证实。参考文献[1]
时
2
组大鼠
、
、
对照组，寸,
丙泊酚、
时
CHEN
K,
YU
J
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Q
Y,
ch
al
The
timinc of
propofol
aCministratiou affects
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remote
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pre-
couCitiouinc
indpced
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rats
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组大鼠
区
对照组,（下转第71面）
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Clinicei
Medicine
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PracticeJ
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交叉腿技术释放支架，既可降低腿支扭结的风险,
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AbOominai
ao—ie
aeeurysm：
update
on
patho-
n支的长度，从而降低n内动脉开口覆
盖、支架远端延伸到n外动脉的发生率⑼。还可缩短geuesis
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treatmeuts
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者术后接受二次手术干预的主要原因。根据动脉
瘤瘤体的形态、角度等具体条件选择合适的腔内
修复技术，术后按时随访均是提高AAA患者手术
的应用价值分析[]?包头医学,2019, 43(3)
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